Возраст-ассоциированные эффекты глутамил-цистеинил-глицина динатрия в комплексной схеме лечения мультирезистентного туберкулеза (экспериментальное исследование)

Изучали влияние сочетания глутамил-цистеинил-глицина динатрия и бедаквилина на лечение мультирезистентного туберкулеза у кроликов разного возраста. Комбинированная терапия улучшала состояние животных, уменьшала воспаление и размеры поражений в легких, особенно эффективно проявляя себя у пожилых особей. Полученные данные подчеркивают значимость учета возраста пациента при назначении противотуберкулезной терапии.

АКТУАЛЬНОСТЬ. Высокая заболеваемость туберкулезом и трудности его лечения у лиц старших возрастов являются актуальной проблемой фтизиатрии и гериатрии. Растущая лекарственная устойчивость микобактерий и увеличение количества больных с иммунодефицитными заболеваниями обусловливает поиск и разработку новых лекарственных средств. Глутамил-цистеинил-глицин динатрия показал высокую эффективность как средство профилактики и лечения вторичных иммунодефицитных состояний, ассоциированных с радиационными, химическими и инфекционными факторами. Являясь структурным аналогом окисленного глутатиона, глутамил-цистеинил-глицин динатрия обладает высокой биодоступностью, модулирующим действием на внутриклеточные процессы тиолового обмена, способствует инициации системы цитокинов, активации фагоцитоза. Глутамил-цистеинил-глицин динатрия разрешен к применению при туберкулезе легких, однако возраст-ассоциированные эффекты не изучались.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Оценка возраст-ассоциированных эффектов глутамил-цистеинил-глицина динатрия в сочетанном применении с бедаквилином при мультирезистентном туберкулезе у кроликов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Были сформированы 3 группы по 25 кроликов в каждой со стандартными лабораторными условиями содержания: 1-я ― животные молодого возраста (1 год), масса тела ― 1 000–1 200 г; 2-я ― животные среднего возраста (4 года), масса тела ― 1 700–1 900 г; 3-я ― животные пожилого возраста (7 лет), масса тела ― 2 000–2 300 г. В каждой возрастной группе было выделено по 3 подгруппы: 1-я (n = 5) ― контроля заражения (зараженные животные, без лечения); 2-я (n = 10) ― контроля лечения (зараженные животные, получавшие только бедаквилин); 3-я (n = 10) ― основная (зараженные животные, получавшие бедаквилин + глутамил-цистеинил-глицин динатрия). Таким образом, было сформировано девять подгрупп: 1.1 ― подгруппа контроля заражения животных молодого возраста; 2.1 ― подгруппа контроля заражения животных среднего возраста; 3.1 ― подгруппа контроля заражения животных пожилого возраста; 1.2 ― подгруппа контроля лечения животных молодого возраста; 2.2 ― подгруппа контроля лечения животных среднего возраста; 3.2 ― подгруппа контроля лечения животных пожилого возраста; 1.3 ― основная подгруппа животных молодого возраста; 2.3 ― основная подгруппа животных среднего возраста; 3.3 ― основная подгруппа животных пожилого возраста.

Заражение проводили внутривенно клиническим штаммом M. tuberculosis с множественной лекарственной устойчивостью. Лечение бедаквилином и глутамил-цистеинил-глицином динатрия начиналось на 3-й день после заражения. Наблюдали за состоянием животных, физической активностью, потреблением пищи и воды, динамикой веса. Использовали КТ легких и тесты на реакцию гиперчувствительности. Данные обрабатывались с помощью пакета программ Statistica 7.0.

РЕЗУЛЬТАТЫ. Мониторинг состояния животных через 6 недель после заражения позволил получить следующие результаты.

Молодые кролики (1 год). Подгруппа контроля заражения: плохое состояние, низкая активность, малое потребление пищи и воды. Подгруппа контроля лечения: удовлетворительное состояние, хорошая активность, нормальное потребление пищи и воды. Основная подгруппа: отличное состояние, максимальная активность, усиленное потребление пищи и воды.

Кролики среднего возраста (4 года). Подгруппа контроля заражения: плохое состояние, сниженная активность, малое потребление пищи и воды. Подгруппа контроля лечения: удовлетворительное состояние, хорошая активность, повышенное потребление пищи и воды. Основная подгруппа: хорошее состояние, высокая активность, умеренное потребление пищи и воды.

Кролики пожилого возраста (7 лет). Подгруппа контроля заражения: критичное состояние, сильная потеря активности, минимальное потребление пищи и воды. Подгруппа контроля лечения: удовлетворительное состояние, хорошая активность, достаточное потребление пищи и воды. Основная подгруппа: удовлетворительное состояние, средняя активность, средние показатели потребления пищи и воды.

В первые 3 недели после заражения отмечен прирост массы тела во всех подгруппах, в 4-ю и 5-ю недели на фоне отчетливого снижения этого показателя в подгруппах контроля заражения и контроля лечения наблюдали повышение средней массы животных в основных подгруппах. В ответ на внутрикожное введение пробы с туберкулезным рекомбинантным аллергеном («Диаскинтест») через 18 дней после инокуляции микобактерий туберкулеза у интактных экспериментальных животных отмечали отрицательную реакцию, у всех модельных кроликов регистрировали положительный результат пробы в виде развития эритемы размером (18,50 ± 1,49) мм (р < 0,0001), что свидетельствовало о наличии сенсибилизации и подтверждало развитие туберкулезного процесса. Компьютерная томография (КТ) органов грудной клетки животных из подгрупп контроля заражения (подгруппы 1.1, 2.1, 3.1) во всех 3 изучаемых возрастных группах показала наличие крупных полициклических инфильтратов гетерогенной плотности в верхних долях легких, наиболее вероятно специфического характера. При этом в группе животных пожилого возраста патофизиологические изменения формировались быстрее и носили более выраженный характер. КТ органов грудной клетки животных из подгрупп контроля лечения (подгруппы 1.2, 2.2, 3.2) во всех 3 изучаемых возрастных группах показала наличие небольших фокусов инфильтрации в легких с участками по типу матового стекла по периферии. При этом наблюдаемые изменения в группах кроликов среднего и пожилого возраста носили более отчетливый характер и отличались большей длительностью с тенденцией к хронизации патологического процесса. КТ органов грудной клетки животных из основных подгрупп (подгруппы 1.3, 2.3, 3.3) во всех 3 изучаемых возрастных группах показала наличие в легких очагово-инфильтративных изменений слабой интенсивности, которые имеют меньшую выраженность, чем у животных из подгрупп контроля лечения соответствующих возрастных групп. У молодых кроликов после заражения наблюдали мелкие очаговые тени в субплевральных областях легких, соответствующие первичным очагам инфекции. У кроликов среднего и пожилого возрастов были выявлены более обширные инфильтраты и очаговые тени, занимающие значительные участки легкого. У кроликов пожилого возраста наблюдали признаки активного воспаления с наличием экссудата в альвеолах. Увеличение размеров внутригрудных лимфатических узлов, особенно бронхопульмональных и трахеобронхиальных, наблюдали у кроликов всех изучаемых возрастных групп. Масса тела кроликов была нестабильной на протяжении всего эксперимента. Изменения зависели от возраста и режима лечения. КТ легких подтвердила формирование туберкулезных изменений разной степени тяжести в зависимости от возраста и лечения. В целом леченые животные демонстрировали лучшие показатели здоровья, активности и аппетита по сравнению с нелечеными.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Полученные результаты подтверждают наличие воспалительного процесса у животных в подгруппах контроля заражения всех возрастов. Воспалительные изменения также наблюдались в основных подгруппах и подгруппах контроля лечения, причем они были более выражены в последних. КТ легких в основных подгруппах показала менее выраженные очагово-инфильтративные изменения по сравнению с подгруппами сравнения, что указывает на потенцирующее действие глутамил-цистеинил-глицина динатрия. Исследование демонстрирует потенциал этого вещества в сочетании с бедаквилином и открывает перспективы для его включения в схемы лечения туберкулеза, в том числе с учетом возрастных аспектов